熒光素的五大類，你知道幾個
1、熒光蛋白
熒光蛋白又可以分為兩組：
第一組蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)編碼了熒光。這些熒光蛋白包括綠色熒光蛋白（GFP）、YFP、RFP和各種衍生物。這些熒光蛋白可以克隆到研究者最喜歡的靶標載體中，并通過使用該熒光蛋白來跟蹤靶標的表達。
第二類熒光蛋白是衍生自在藻類和植物中發(fā)現(xiàn)的藻膽蛋白的那些。這些蛋白質(zhì)使用藻膽蛋白輔因子來吸收光能，包括藻紅蛋白（PE）、別藻藍蛋白（APC）和紫草素葉綠素（PerCP）。植物素蛋白，尤其是PE，是研究人員目前可獲得的最亮的熒光分子（下圖為藻紅蛋白及其輔因子的結(jié)構(gòu)）。
應該注意的是，雖然這些分子在流式細胞術中表現(xiàn)非常好，但是不太適用于熒光顯微鏡，因為它們會被快速淬滅。
2、合成類小分子
合成類分子熒光素是在流式細胞術中具有悠久歷史的廣泛類型的相對較小的熒光化合物。
這些分子在環(huán)、鏈或其組合中都含有至少一個共軛雙鍵體系，在受光激發(fā)時發(fā)生改變（參見下圖，F(xiàn)ITC和Cy5的結(jié)構(gòu)）。
合成染料可覆蓋整個光譜，并可通過不同配置改變其溶解度和細胞通透能力。
3、量子點
在二十世紀末期，量子點（QDots）染料漸漸開始普及。QDot是一種半導體，可以根據(jù)粒子的尺寸調(diào)整其不同的發(fā)射波長（參見下圖的QDot熒光圖）。
這些QDots具有亮度高、光穩(wěn)定性好，但由于在流式細胞術中，QDots通常被紫激光激發(fā)，所以可能影響了其普及性。盡管Qdot也可以被低于發(fā)射光最大值的激光激發(fā)，但設計方案時還是需要注意。
4、聚合物染料
聚合物染料由Sirigen開發(fā)，亮度高，主要是紫光和紫外光激發(fā)（BV系列和BUV系列），還有藍光激發(fā)的系列（Brilliant Blue）。
5、串聯(lián)染料
串聯(lián)染料是利用F?rster共振能量轉(zhuǎn)移（稱為FRET或熒光共振能量轉(zhuǎn)移）原理的特殊類別的熒光分子。
在這個過程中，兩個熒光染料在位置上非常近。 供體分子的發(fā)射光必須與受體分子的激發(fā)光波長重疊。
當供體分子被激發(fā)時，電子被促進到更高的能量狀態(tài)，并將能量轉(zhuǎn)移到受體分子，其本身則返回到基態(tài)，從而產(chǎn)生另一種波長的光子。
了解了染料的種類及其原理，對于我們挑選染料還是有一定幫助的。
